乌江新高考协作体2023-2024学年(下)期高三初(开学)学业质量联合调研抽测生物试题正在持续更新，目前大联考答案为大家整理了相关试题及答案，供大家查缺补漏，高效提升成绩。

21、(15分)人体内的t-PA蛋白能高效降解血栓，是心梗和脑血栓的急救药。然而，为心梗患者注射大剂量的t-PA蛋白会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行序列改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该改良基因，可制造出性能优异的t-PA改良蛋白。下图是通过两次PC操作，运用大引物进行定点突变获取t-PA改良基因和利用质粒pCLYII构建含t-PA改良基因的重组质粒示意图。（注：一次PCR操作可进行多次循环）拟突变位点常规下游引物限制性内切核酸酶识3'◆5y别序列和切割位点5'335Sma I Xma I5入+3Bgl IIBgⅡAGATCT突变上游引物-Nhe INhe I GCTAGC|第一次PCRpCLY11JSma I CCCGGG大引物到人◆3'①Xma I CCCGGG-5'②neo':新霉素抗性基因下游大引物3'-5'→重组质粒3◆3常规上游引物|第二次PCRCCGG3TAG.5tPA改良基因(1)科学家将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，生产出性能优良的t-PA突变蛋白属于」工程。t-PA改良基因形成是t-PA基因发生了碱基的（2)己知t-PA蛋白第84位是半胱氨酸，相应的基因模板链（图中t-PA基因的上链)上的碱基序列是ACA,丝氨酸的密码子是UCU。获取t-PA突变改良基因过程中需要以下三种引物：引物I:5'-CGCGAAA?AGACGGTTCA-3'(下划线？为突变基因位点)引物Ⅱ：5'-ACCCGGGCGAACATCGTA-3'(下划线字母为XmaI酶切序列)引物Ⅲ：5'-GTAGATCTGGCCTCGAGTA--3'(下划线字母Bg1Ⅱ为酶切序列)在上述引物中，引物1中突变基因位点是碱基，第一次PCR操作中使用的引物有。第二次PCR操作中使用的引物有,另外一种引物是大引物的(填“①”或“②”)链。(3)PCR操作中退火的目的是第二次PCR过程中至少需要次循环才能获得双链等长t-PA改良基因。（4)研究人员将重组质粒导入到大肠杆菌常用的方法是转化后的大肠杆菌需接种在含有」的培养基上进行筛选。对于该基因的检测，通常需进一步通过鉴定，而不用PCR产物凝胶电泳的结果，原因是江西省重点中学协作体2024届高三第一次联考生物试卷第8页共8页