高三2024年贵州省普通高中学业水平选择性考试冲刺压轴卷(六)6生物(贵州)试题正在持续更新，目前大联考答案为大家整理了相关试题及答案，供大家查缺补漏，高效提升成绩。

22.(13分)虫草中的超氧化物歧化酶(PS$OD)具有抗衰老作用。研究人员培育了能合成PSSOD的转基因酵母菌。结合下图回答下列问题。ApaLI外源PSSOD基因氨苄青霉素抗性基因ApaL IHind IⅡ基因表达载体URA3基因注：HindIII和ApaLI是两种限制酶，箭头表示酶的切割位置(1)利用表达载体构建重组DNA:由于载体上的启动子往往具有物种特异性，PSSOD基因上游的启动子应选择▲（填“虫草”、“酵母菌”或“虫草或酵母菌”）的启动子。若将图中的重组DNA分子用HindIII和ApaLI完全酶切后，则可得到▲_种DNA片段。(2)导入、筛选和鉴定转基因酵母菌。①作为受体细胞的酵母菌缺失URA3基因，必须在含有了尿嘧啶的培养基中才能存活，为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌，所使用的培养基▲（填“需要”或“不需要”）添加尿嘧啶，理由是▲。配制的培养基需进行▲灭菌，灭菌后的培养基不适于直接用来接种，需要▲到较小的培养容器中，此操作最好在超净工作台内的酒精灯火焰旁完成。②将PSSOD基因导入受体细胞内，并且在受体细胞内维待稳定和表达的过程，称为▲。为了确定受体细胞中PS$OD基因是否转录，可用标记的▲作探针与从受体细胞中提取的RNA进行分子杂交检测，分子杂交的原理是▲。③为确定PSSOD基因（碱基序列已知）的插入位置，可以用反向PCR技术测定插入部位的碱基序列，其原理如图：两侧未知序列目的基因两侧未知序列a.↓酶切b环化上引物引物不化↓反向PCRd引物↓PCR测序e.引物不直接在上图a中的DNA分子的两端设计引物并进行广增，原因是▲。PCR测序与反向PCR▲（填“可以”或“不可以”）选用相同的一对引物，原因是▲。(3)利用蛋白质工程获得活性更高的PSSOD时，需根据所设计蛋白质的结构推测其氨基酸序列，最终确定相对应的脱氧核苷酸序列并经▲获得所需的基因。生物试题卷第8页（共10页)